期刊简介

  本刊是由中国实验动物学会主办的国家级学术期刊。主要刊载有关实验动物和动物实验的理论专著、科研成果论文、科学实验新方法、新材料、实验动物新资源开发、新的动物品系的培育和应用以及实验动物有关的其他学科的科学论述。读者对象:农牧渔业、医学、药学、环保、生物、体育、国防等单位的科技工作者、管理人员以及有关的生产者、大专院校学生等。


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  • 杂志名称:中国比较医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国实验动物学会,中国医学科学院医学实验动物研究所
  • 国际刊号:1671-7856
  • 国内刊号:11-4822/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
中国比较医学杂志2012年第03期

猪伪狂犬病毒gB基因在大肠杆菌中的分段表达

包新奇;黄绍华;刘巧荣;孙明;杨璐;申屠芬琴;康立平;陈西钊

关键词:PRV, GB, 分段表达, ELISA
摘要:目的 分段表达伪狂犬病毒( pseudorabies virus,PRV)gB基因,用于PRV疫苗免疫抗体评估试剂盒研究.方法 分析gB抗原表位,设计4对特异性引物,从PRV新疆分离株中扩增gB基因的4个片段,分别命名为gB-1、gB-3、gB-4和gB-5基因,克隆到pGEM-T-easy载体并测序.再将4个gB基因片段融合到pGEX-6P-1原核表达载体中,表达并纯化.Western Blotting进行重组蛋白的抗原性检测.以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测猪血清临床样品.结果 构建的4种表达质粒均可在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,表达分子量分别为75.05、53.86、49.96和49.72×103Da,其中gB-3、gB-4和gB-5表达量较高,表达产物主要存在于包涵体中.Western Bloting鉴定显示,4种融合蛋白均可被猪伪狂犬阳性血清特异识别.以gB-3、gB-4和gB-5建立的ELISA方法与IDEXX公司的gB-ELISA试剂盒符合率分别为40.9%、81.8%和81.8%.结论 本研究成功表达了PRV的gB-1、gB-3、gB-4和gB-5重组蛋白,gB-3、gB-4和gB-5表达量较高;其中以gB-4和gB-5建立的间接ELISA方法与IDEXX公司的符合率较高.